VDRL

● PRÁCTICA DE VDRL - USR ●

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y L. C. R. (no requiere reconstitución)

 

Agente de Diagnóstico

 

Introducción

Treponema pallidum, la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.

Su diagnóstico puede ser serológico, con lo que se pueden determinar dos clases de anticuerpos:

1.    Tipo “cardiolipina”.- No treponema e inespecíficos

2.    Antitreponemas específicos

 

La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratoy VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponemica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con  el método cualitativo empleando la  placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.

También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.

 

 

 

Reactivos y material proporcionado

 

-Antígeno en suspensión  estabilizada (VDRL)

-Control positivo

-Control negativo

-AGUJA No. 21sin bisel

-Pipetas  desechables (únicamente para presentaciones de 100 pruebas)

 

 

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO

 

El antígeno VDRL y los Sueros Controles  son estables hasta su  fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando de almacena de 2° a 8° C   NO CONGELAR.

 

 

 

 

Material y equipo necesario no proporcionado.

-Placa cóncava (indispensable)

-Agitador Mecánico

-Cronometro

-Microscopio

 

Obtención de la muestra

 

- Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa.

- Centrifugar y separar el suero.

 

 Método cualitativo.

 

 

 

1.    En un anillo de la placa cóncava  depositar 0.05 ml de suero problema.

 

 

2.    En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, extender sobre la superficie de los anillos

 

3.    Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado previamente resuspendido en cada una de las muestras
utilizando la aguja  N.21 sin bisel.

 

 

4.    Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min. Las pruebas realizadas en un clima extremadamente seco puede provocar la evaporación de las muestras; por lo tanto la placa en rotación puede ser cubierta con una tapa de caja petri húmeda previamente con grasa.

 

5.    Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10X.

INTERPRETACIÓN

Control Positivo

 

 Presencia de floculación  mediana o grande.

 

Control Negativo

 

Ausencia de floculación.

   

Método cuantitativo.

1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa.

 

1. Colocar en una gradilla 6 tubos  de 12 x 75 mm y numerarlos.

 

1. Agregar a cada uno 0.5 ml. de solución salina al 0. 9%.

 

1. Depositar 0.5 ml. de suero al tubo No.1 y mezclar.

 

1. Pasar 0.5 ml. del tubo No. 1 al tubo No.2 mezclar.

 

1. Pasar 0.5 ml. del tubo No.2 al tubo No. 3 mezclar.

 

1. Continuar con este proceso hasta el tubo 6.

 

1. Depositar 0.05 ml. de cada una de las diluciones sobre los diferentes anillos de la placa cóncava.

 

1. Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado (VDRL) utilizando la aguja No.21 sin bisel a cada una de las  diluciones.

 

1. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min.

                                                                                                    

1. Leer al microscopio con objetivo y ocular 10x.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Interpretación.

 

El título del suero problema será la última dilución que presente un resultado positivo. Ejemplo:

 

Si se presenta floculación hasta el tubo 3 – dilución 1:8, por lo tanto el título será 1:8.

 

1. Nota:
   Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.
2. 
   Sueros débiles positivos y fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar el fenómeno de prozona.
3. 
   Si la lectura del resultado no se realiza inmediatamente después de los 4 min. puede secarse la reacción y dificultad en la interpretación.
4. 
   El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.

 

Resultados:

	Valores de Referencia	Valores de referencia
Paciente 1	CONTROL POSITIVO Presencia de floculación mediana o grande	Negativo
Paciente 1	CONTROL NEGATIVO Ausencia de floculación	Negativo