ROSA DE BENGALA (antígeno brucelar amortiguador)
INTRODUCCION:
La brucelosis es una enfermedad causada por La bacteria Brucella esta puede infectar al ganado vacuno, las cabras, los camellos, los perros y los cerdos. La bacteria se puede diseminar a los humanos si usted entra en contacto con carne infectada o la placenta de animales infectados o si bebe leche o come queso sin pasteurizar.
La prueba del Rosa Bengala o prueba del antígeno tamponado de
Brucella, es una técnica rápida de aglutinación en porta para la
detección de anticuerpos anti-Brucella en sueros animales y
humanos
La determinación se efectúa ensayando la suspensión tamponada
(pH 3,6) de Brucella coloreada con Rosa Bengala frente a los
sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible
es indicativa de la presencia o ausencia de anticuerpos en las
muestras ensayadas.
NOTA:
Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.
FUNDAMENTO:
Para realizar esta técnica es importante saber que es utilizada para un diagnostico temprano de brucelosis ya que es especifica por la detección de aglutinas de brucella de forma rápida.
MATERIAL Y REACTIVOS:
v Antígeno rosa de bengala
vControl positivo de brucella
vControl negativo de brucella
vPlaca
vPipetas automáticas.
Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.
Obtención de la muestra:
•Obtener 3.0 ml de sangre por punción venosa
•Centrifugar y separar el suero.
PROCEDIMIENTO:
v utilizar una pipeta automática que adicione 0.03ml de muestra de suero en el circulo de la placa.
vMezclar el antígeno rosa de bengala hasta que este totalmente homogenizada, después colocar 0.03ml en la placa en el mismo aro donde esta la muestra , s mezcla con un aplicador. Repetir paso para los controles.
vAgitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
vObservar el resultado con la ayuda de una fuente de luz ,leer directamente.
v
NOTA:
Después de leer los resultados y pase cierto tiempo ya no es valida ya que la lectura debe ser inmediata.
SI EL RESULTADO HUBIESE SALIDO POSITIVO DEBE SER CONFIRMADA MEDIANTE OTRA PRUEBA CUANTITATIVA PARA BRUCELOSIS COMO: AGLUTINACION LENTA ESTANDAR O AGLUTINACION EN PRESENCIA DE 2-MERCAPTOETANOL.
FALSOS POSITIVOS:
La contaminación bacteriana de controles y muestras, así como
la congelación y descongelación del antígeno, son causas
generales de resultados positivos falsos.
Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras
pueden ocasionar asimismo falsas positividades. Lavar las
tarjetas bajo el grifo hasta que se hayan eliminado todos los
residuos y enjuagarlas con agua destilada. Secar al aire,
evitando el empleo de solventes orgánicos puesto que modifican
el acabado especial de las placas.
La suspensión antigénica no debe utilizarse con posterioridad a
su fecha de caducidad, puesto que un almacenamiento más
prolongado puede afectar su sensibilidad.
CONCLUSION:
En el serodiagnóstico de la brucelosis humana, la prueba del Rosa
Bengala tiene un valor importante en el campo epidemiológico al
permitir agrupar los casos con alto riesgo de infección del resto de
la población estudiada. En el campo veterinario es frecuente su
utilización como prueba diagnóstica en cabañas de vacuno y
porcino en las que la incidencia de brucelosis es relativamente alta,
aplicándose sólo como prueba de control rápido en áreas de baja
incidencia.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los
anticuerpos anti-Brucella deben ser considerados siempre en
relación a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio. Es por esto el por que de la importancia de esta técnica.
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